• 產(chǎn)品品牌： REAGEN
• 產(chǎn)品貨號： RN102FP
• 產(chǎn)品規(guī)格： 50/100T
• 產(chǎn)品適用： 該試劑盒用于體外定性檢測女性宮頸細胞中的人乳頭瘤病毒（Human papillomavirus，HPV）16型和18型的DNA核酸片段。
• 產(chǎn)地來源： 深圳
• 保質(zhì)期： 12個月

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：人乳頭瘤病毒(HPV)16型、18型核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)

【包裝規(guī)格】

50人份/盒

【預期用途】

該試劑盒用于體外定性檢測女性宮頸細胞中的人乳頭瘤病毒（Human papillomavirus，HPV）16型和18型的DNA核酸片段。

【檢驗原理】

本試劑盒采用聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）結(jié)合Taqman技術(shù)，對人乳頭瘤病毒（Human papillomavirus，HPV）16型和18型的特異性DNA核酸片段進行熒光PCR定量檢測。

【主要成分】

 【儲存條件及有效期】

試劑置于-30~-15℃避光保存，有效期為12個月。本產(chǎn)品反復凍融應(yīng)不超過5次。

【適用儀器】

熒光定量PCR儀：ABI 7500熒光PCR儀.；ABI Quantstudio5 ；Gentier 96R；SLAN-96P全自動醫(yī)用PCR分析系統(tǒng)。

【樣本要求】

1. 適用樣本

女性宮頸拭子樣本。

2. 采集方法

先用棉拭子將宮頸口過多的分泌物擦去，用擴陰器擴陰，再換取棉拭子伸入宮頸，通過上皮交界處，直到看不到拭子頭，旋轉(zhuǎn)10-20秒，取出拭子，將拭子置于無菌玻璃管中，密閉送檢。

3. 樣本運輸和保存

樣本保存：待測樣本，可立即進行核酸提取處理；如果樣本需要在24小時內(nèi)檢測，可先置于2~8℃保存；如果樣本在24小時內(nèi)無法檢測，則可置于-20℃~-80℃保存，盡量避免反復凍融，導致假陰性。

樣本運輸：采用低溫運輸，樣本運輸應(yīng)遵守國家關(guān)于第二類病原微生物的相關(guān)生物安全規(guī)定。

 【檢驗方法】

1. 樣本處理

樣本試管中加入1ml生理鹽水，充分震蕩混勻，按照核酸提取試劑盒說明書進行核酸提取，取待測樣本、陰性對照、陽性對照各200μL，進行后續(xù)提取。

2. 試劑配置（在準備區(qū)進行，與擴增區(qū)分開，冰上操作）

注：試劑使用前要完全解凍，使用前渦旋混勻，10000 rpm離心5 s，確保試劑完全離心至管底，否則會出現(xiàn)裝量差異的現(xiàn)象。

若有N個待檢測樣本，則需配置N擴增反應(yīng)，按下表要求進行擴增反應(yīng)液的配制，配制完成后充分震蕩混勻，10000 rpm離心5 s。按每管15μL分裝至0.2 ml PCR管中，并做好標記，擴增反應(yīng)液需現(xiàn)配現(xiàn)用。

3. 加樣（在樣品處理區(qū)進行，冰上操作）

按陰性質(zhì)控品、待測樣品、陽性質(zhì)控品的加樣順序，分別取5μL，加入至已分裝擴增反應(yīng)液的八聯(lián)管中，反應(yīng)總體系為25μL。蓋緊管蓋，短暫離心后置于熒光定量PCR儀中，并記錄樣本擺放順序。

4. 擴增反應(yīng)（在擴增區(qū)進行）

選擇FAM通道檢測HPV 16型核酸，選擇ROX通道檢測HPV 18型核酸，選擇CY5通道檢測內(nèi)標。按以下擴增程序表設(shè)置PCR擴增參數(shù)。

5.質(zhì)量控制

6.結(jié)果判讀

反應(yīng)結(jié)束自動保存結(jié)果，根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié)Baseline 的Start 值、End 值以及Threshold 值（可以根據(jù)實際情況自行調(diào)整，Start 值可以在3~15、End 值可設(shè)在5~20，調(diào)整陰性對照的擴增曲線平直或低于閾值線），點擊Analysis 自動獲得分析結(jié)果，在Report 界面觀看結(jié)果。

【檢驗結(jié)果的解釋】

1．實驗室環(huán)境污染，試劑污染，樣品交叉污染會出現(xiàn)假陽性結(jié)果，如陰性對照檢測為陽性，則需做進一步實驗來確認是哪類污染。如為試劑污染，需開封新的試劑盒再次進行實驗；如為樣品交叉污染，應(yīng)重復實驗；如為實驗室環(huán)境污染，需對實驗室進行徹底清潔或更換實驗室再進行實驗。

2．試劑運輸、保存或配制不當會引起試劑檢測性能下降，出現(xiàn)假陰性結(jié)果。如陽性對照檢測為陰性，應(yīng)開封新的試劑盒再進行實驗。

【檢測方法的局限性】

1. 該試劑盒僅為定性產(chǎn)品，不做定量測定。

2. 該試劑盒的檢測結(jié)果僅供臨床參考，對患者的臨床診治應(yīng)結(jié)合其癥狀或體征、病史、其它實驗室檢查及治療反應(yīng)等情況綜合考慮。

3. 當樣本的病毒含量低于最低檢出限時，可能會出現(xiàn)假陰性。陰性結(jié)果僅說明提取的核酸濃度低于該試劑盒的檢測極限，但不能完全排除細菌感染的可能。

【產(chǎn)品性能指標】

1.準確性：企業(yè)陽性參考品檢測結(jié)果全部為陽性，陽性率為15/15。

2.最低檢測限：該試劑盒HPV16型和HPV18型的最低檢測限均為500copies/mL。

【注意事項】

1．請嚴格按照操作步驟操作，試劑配制和加樣等步驟請嚴格按照說明書要求在冰上操作。

2．試劑配制建議在試劑配制區(qū)進行，樣品處理要求在生物安全柜內(nèi)操作。臨床實驗室應(yīng)嚴格按照《醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室管理辦法》等有關(guān)分子生物學實驗室、臨床基因擴增實驗室的管理規(guī)范執(zhí)行。

3．反應(yīng)液中的成分對光敏感，應(yīng)避光保存。反復凍融可能降低試劑盒靈敏度，請按檢測頻次將反應(yīng)液以適當體積分管保存。

4．反應(yīng)結(jié)束后，擴增管請置于密封袋內(nèi)丟棄，當日清理，切忌開蓋。

5．不同批號試劑請勿混合使用，請在有效期內(nèi)使用試劑盒。

6. 本品僅用于體外診斷。